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細胞培養注意事項
瀏覽次數:119發布日期:2022-08-12

一、細胞復蘇

將凍存細胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內不斷搖動促進其融化。移人15ml離心管中,加入10ml預熱的DMEM完全培養基,輕輕吹勻,離心,2000rpmX2min,棄上清液。


二、細胞傳代

加入10ml PBS清洗細胞培養盤,轉移至15ml離心管,2000rpmX2min,棄上清液。再加入10ml PBS(經高壓滅菌,保存于40C),吹勻,吸取10微升進行計數,按照1×106/盤接種,在含5%CO2的細胞培養箱繼續培養。


細胞密度達到80%~90%時,去培養基,10ml PBS清洗2次。放人細胞培養箱3min。轉移至15ml離心管。加入10ml PBS清洗細胞培養盤,轉移至15ml離心管,2000rpmX2min,棄上清液。


凍存液的配制:70%的完全培養基+20%FBS+10%DMSO.DMSO要慢慢滴加,邊滴邊搖。

1.進入細胞間開始細胞培養時,必須嚴格按照下列步驟操作:


2.確定衣服的袖口已經卷起或者白大褂的袖口已經扎緊。


3.確定所有需要用到的溶液和耗材都放在伸手可及的位置。為了方便單手開啟瓶蓋,實驗開始前可以把所有瓶蓋旋松。


4.操作時如果不能肯定所用的耗材是潔凈的,必須及時更換。


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